ELISA样本制备指南及注意事项

ELISA样本制备指南及注意事项

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定义及介绍

ELISA（enzyme linked immunosorbent assay，酶联免疫吸附测定）是最基础的免疫学实验之一，其理论基础是的特异性反应。ELISA因其特异性强、灵敏度高、稳定性好而被广泛使用。ELISA试剂盒检测样品包括血清、血浆、细胞培养上清、灌洗液或尿液等生物样本，实验操作步骤并不繁琐，但实验完成后需要把样本检测结果OD值转化为浓度值，从而供下一步分析所用，因此样品的预处理对于后续数据处理和结果分析非常重要。

样本制备指南

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血清

全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于2-8℃，1000×g离心20min，取上清即可检测。收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。避免使用溶血，高血脂样品

2.血浆

不匹配而出现不能检测的情况。

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对于组织匀浆、组织全蛋白、细胞提取液等蛋白提取样本，经BCA法测定样本蛋白含量后，建议进行蛋白浓度的统一化，避免因组织重量、细胞数、产物体积等因素造成的人为误差；例如，统一全部检测样本浓度为1-2mg/mL，进行后续的稀释和检测。

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封面新闻记者 周家夷

2019年3月1日，四川省妇幼保健院胚胎植入前遗传学诊断/筛查技术（俗称第三代试管婴儿）经过国内专家的严格评审，获得了试运行批准。如今，医院首例染色体平衡易位携带者三代试管已经通过产前诊断证实，完全正常的“奇迹宝宝”即将在2020年新年诞生。

最近，接受此项技术的阳光（化名）夫妇心里乐开了花，不仅因为多年不育的他们即将迎来新生命，更因为这个孩子将是一个完全健康的宝宝。

第三代试管婴儿技术 基因检测避免遗传缺陷

该院生殖中心负责人说，第一代试管婴儿也就是人们常说的常规体外受精试管婴儿技术，主要解决输卵管性不孕；第二代试管婴儿是单精子卵胞浆内注射试管婴儿技术，主要解决男性因素不孕。第一代和第二代区别在于体外受精方式。第三代试管婴儿并不是受精方式的改变，而是在得到胚胎后进一步对胚胎进行遗传学检测,避免有遗传缺陷的胚胎植入母体，从而阻断遗传性疾病的发生。

三代试管完美圆梦 新生命将于新年出生

此次接受试管婴儿技术的是一对很恩爱的小夫妻，多年不育，一方为染色体平衡易位携带者。如果夫妻双方的其中一方是染色体平衡易位，他们的外貌、智力、发育与正常人无区别，但是到生育期可能会因为产生的精子或者卵子异常，导致发生不孕不育、反复流产、胎儿畸形或生育智力低下儿等情况。理论上，这类携带者生育染色体完全正常后代的概率仅为1/18。

2019年3月初，在得知四川省妇幼保健院生殖医学中心获得批准试运行第三代试管婴儿后，他们慕名赶来，在和生殖医学中心和医学遗传与产前诊断中心的专家们进行了详细沟通后，当即决定加入省妇幼首批三代试管计划，“希望我们的宝宝能健健康康的。”

随后，生殖医学中心和医学遗传与产前诊断中心两个团队全体人员全力以赴。经过详细的计划制定、严格的流程实施，他们获得了5个可用于遗传学活检的胚胎，采用二代测序技术检测后，筛选出2个可以用于移植的正常胚胎。5月，在准备好子宫内膜后，这颗承载着所有人希望的种子被轻柔的送入妈妈的子宫，10天后，四川省妇幼保健院首例三代试管宣告成功妊娠！

之后，顽强的宝宝一路“过关斩将”，顺利通过早孕和NT检测，当羊水穿刺检验结果出来得知宝宝染色体完全正常的那一刻，夫妻俩悬着的心终于放下了。如今，各项产前检查指标均显示小家伙生长发育正常。准爸爸准妈妈正在安静而热切的期盼宝宝的到来，而四川省妇幼保健院母婴健康中心的“爸爸妈妈”们也在时刻准备着迎接首个奇迹宝宝的降临。